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    關于植物elisa試劑盒檢測樣本的處理方法,我們已經整理好了

    發布時間:2021-08-26   點擊次數:384次
      植物elisa試劑盒檢測應用雙抗體夾心法測定標本中植物淀粉分支酶SBE水平。用純化的植物淀粉分支酶SBE抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入植物淀粉分支酶SBE,再與HRP 標記的植物淀粉分支酶SBE抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物淀粉分支酶SBE呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中植物淀粉分支酶SBE濃度。
     
      樣本處理:
      1、血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
      2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
      3、細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
      4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
      5、保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
      
      植物elisa試劑盒檢測的操作步驟:
      1、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃;
      2、設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
      3、樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加;
      4、除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min;
      5、棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次;
      6、每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min;
      7、每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
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