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    詳細分析大鼠ELISA檢測試劑盒的樣本處理及要求

    發布時間:2021-07-27   點擊次數:426次
      大鼠ELISA檢測試劑盒是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。
     
      大鼠ELISA檢測試劑盒樣本處理及要求:
      1、血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心;
      2、血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心;
      3、尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行;
      4、細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心;
      5、組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用;
      6、標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融;
      7、不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
     
      實驗備注:
      1、用戶在初次使用試劑盒時,應將各種試劑管離心數分鐘,以便試劑集中到管底;
      2、每次實驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是最后加底物溶液及終止液。測量時先用此孔調OD值至零;
      3、為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜;
      4、未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。標準品、生物素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物素標記抗體工作液、或辣根過氧化物酶標記親和素工作液;
      5、建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。
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